利用PinpoRNA原位检测试剂研究特定启动子驱动基因表达的强度

2022年11月28日，《Nature Communications》在线刊登了浙江大学基础医学院/附属第一医院陈宝惠研究员-转化医学研究院/附属第四医院邹炜研究员联合团队的学术论文“Gene activation guided by nascent RNA-bound transcription factors”。该研究开发了Narta（Nascent RNA-guided ranscriptional activation）技术，通过目标基因的新生RNA将大量人工转录激活因子招募到转录位点，从而实现外源及内源基因启动子的高效激活。Narta介导的基因激活是可逆、可调节和特异的。与CRISPRa相比，Narta对部分基因表达的激活强度更高；与CRISPRa联合使用时，可进一步提升某些靶基因的转录水平。

该工作使用广东品博易视生物科技有限公司专利的PinpoRNA^TM（货号PIF1000/PIT0001）技术在单细胞上观察目标基因转录水平成像，直观地观察到Narta激活促进了更多的新生RNA产生。荧光定量PCR和PinpoRNA原位杂交分析显示Narta激活后细胞产生了更多的成熟RNA（图2）。单细胞蛋白定量成像和Western Blotting显示目标基因的蛋白表达水平有了非常显著的提高。Narta技术在HeLa、HEK293T和CHO-K1等细胞系及斑马鱼中均能实现基因激活。另外，Narta技术能增强不同强度的外源启动子表达，包括miniCMV、SFFV、CMV和CAG等，在人类细胞内测试的14个内源基因均表现出不同程度的激活（图3）

PinpoRNA^TM技术简介

PinpoRNA技术是由广东品博易视生物科技有限公司自主专利研发的RNA原位杂交检测试剂。与传统的RNA原位杂交相比，PinpoRNA属于新一代RNA原位杂交技术，是唯一可以更好地替代进口产品得到可比结果的国产试剂。其专利的探针设计和信号放大系统，可以高效完美检测目标RNA。它有如下特点：